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淺述細(xì)胞適應(yīng)msc無(wú)血清培養(yǎng)基的方法News
淺述細(xì)胞適應(yīng)msc無(wú)血清培養(yǎng)基的方法
更新時(shí)間：2021-08-17 點(diǎn)擊次數(shù)：1443次
msc無(wú)血清培養(yǎng)基和試劑被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物細(xì)胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。大多數(shù)的產(chǎn)品含有向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)離子的轉(zhuǎn)鐵蛋白和調(diào)節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素，以及一些蛋白質(zhì)和清蛋白，纖維蛋白，胎球蛋白等，這些蛋白在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同的功能，如提供細(xì)胞貼壁所需的基質(zhì)，抗生物反應(yīng)器剪切力，作為脂質(zhì)和其他生長(zhǎng)分化因子的載體等。
下面要為大家介紹的是細(xì)胞適應(yīng)msc無(wú)血清培養(yǎng)基的方法：
1、直接適應(yīng)：細(xì)胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無(wú)血清培養(yǎng)基（SFM）中。
一些類型細(xì)胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應(yīng)本產(chǎn)品。對(duì)于直接適應(yīng)，接種細(xì)胞密度應(yīng)該:2.5×10~3.5×10細(xì)胞/ml。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1×10~3×10細(xì)胞/ml時(shí)，傳代培養(yǎng)細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞密度在培養(yǎng)4到7天后達(dá)到2×10~4×10細(xì)胞/ml時(shí)，細(xì)胞*適應(yīng)了。每隔3~5天，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1×10~3×10細(xì)胞/ml，細(xì)胞活率在90%時(shí)，貯備的適應(yīng)了本產(chǎn)品的細(xì)胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng)。
2、連續(xù)適應(yīng)：分好幾步把細(xì)胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到本產(chǎn)品中，與直接適應(yīng)相比較，連續(xù)適應(yīng)趨向?qū)τ诩?xì)胞更加溫和一些。
（1）以2倍正常接種密度接種生長(zhǎng)活躍的細(xì)胞培養(yǎng)物到75%有血清培養(yǎng)基：25%SFM混合培養(yǎng)基中，傳代培養(yǎng)。
（2）當(dāng)細(xì)胞密度>5×10細(xì)胞/ml時(shí)，以2×10到3×10細(xì)胞/ml細(xì)胞密度，在有血清培養(yǎng)基：SFM為50∶50的混合培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
（3）以2×10到3×10細(xì)胞/ml細(xì)胞密度，25%有血清培養(yǎng)基和75%SFM中傳代培養(yǎng)。
（4）當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1×10到3×10細(xì)胞/ml（接種后4到6天），在100%SFM培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
（5）每隔3到5天，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1×10到3×10細(xì)胞/ml，細(xì)胞活率在90%時(shí)，貯備的適應(yīng)了無(wú)血清培養(yǎng)基的細(xì)胞培養(yǎng)物應(yīng)該再次傳代培養(yǎng)。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。
